O Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) tem discutido a obrigatoriedade da realização de espermocultura em sêmen industrializado não somente para garantia da biossegurança mas também por falhas na fertilização in vitro pela contaminação dos ovócitos com bactérias ubiquitárias e oportunistas da microbiota prepucial. A técnica quantitativa de Pour Plate, preconizada pela Organização Internacional de Epizootias, é operacionalmente difícil e de custo elevado para a rotina em centrais de inseminação artificial (CIAs). Desse modo, avaliou-se a técnica de contagem de bactérias viáveis por superfície (CBVS) em UFC/mL de sêmen industrializado de touros de CIAs, comparando-a à técnica de Pour Plate, com intuito de validação. Foram empregadas palhetas de sêmen de touros do Projeto Hungria do MAPA. A partir da diluição seriada de 10-1 a 10-5 do sêmem, foram empregadas, paralelamente, as técnicas de Pour Plate e CBVS. A média ou mediana de UFC/mL obtida em cada diluição foi comparada entre as técnicas, e não foram observadas diferenças estatísticas entre as duas técnicas quanto à quantificação de bactérias em UFC/mL, sugerindo a possibilidade de substituição da técnica de Pour Plate pela de CBVS, com vantagens de praticidade e menor custo.

The Brazilian Ministry of Agriculture (MAPA) has discussed the mandatory culture of industrialized semen, both to ensure biosefety, and to prevent in vitro fertilization problems caused by oocyte contamination with ubiquitous and opportunistic bacteria from preputial microbiota. Pour plate, a quantitative technique recommended by the World Organization for Animal Health (OIE), is operationally difficult and costly for routine analysis in Artificial Insemination Centers (AICs). The objectives of this study were to evaluate and validate viable superficial bacteria counts (VSBC), in CFU/mL, compared with pour plate counts, in industrialized bull semen samples from AICs. Semen straws from Projeto Hungria - MAPA bulls were used. VSBC and pour plate were carried out in parallel in serial dilutions of the samples, from 10-1 to 10-5. CFU/mL means or medians recorded in each dilution and technique were compared, and no statistical differences were observed between the two techniques regarding the quantification of bacteria in CFU/mL, suggesting that it may be possible to replace pour plate for CBSV, a cheaper and more practical technique.

RESUMO O objetivo do presente trabalho foi determinar a frequência de propriedades positivas (focos) e de animais soropositivos para a brucelose bovina no Estado da Paraíba. Foram utilizados dados da Agência de Defesa Agropecuária do Estado, coletados de suas 23 microrregiões, durante o período de janeiro de 2008 a julho de 2009. Durante esse período, foram examinadas 11.149 propriedades, e 55.691 soros de bovinos foram submetidos ao diagnóstico de brucelose. Para o diagnóstico sorológico, foi utilizado o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT). Uma propriedade foi considerada foco quando apresentou pelo menos um animal soropositivo. Das propriedades investigadas, 104 (0,93%) apresentaram pelo menos um animal soropositivo e, dos animais analisados, 199 (0,36%) foram soropositivos. Houve diferença significativa (p < 0,001) na proporção de fêmeas (0,47%) e machos (0,04%) soropositivos.

ABSTRACT The aim of this study was to determine the frequency of positive herds (foci) and seropositive animals for bovine brucellosis in the state of Paraíba, Northeast region of Brazil. Data from the Agency of Agricultural Protection in the state, collected from its 23 microregions, during the period from January 2008 to July 2009, were used. During this period, 11,149 herds were examined, and 55,691 cattle sera were submitted to the diagnosis of brucellosis. For serological diagnosis the rose bengal test was used. A herd was considered a focus when it presented at least one seropositive animal. Of the herds investigated, 104 (0.93%) had at least one seropositive animal, and of the animals examined, 199 (0.36%) were seropositive. There was a significant difference (p < 0.001) in the proportion of seropositivity for females (0.47%) and males (0.04%).

RESUMO Foram colhidas amostras de placenta, ampola do ducto deferente e glândulas vesiculares de 80 ovinos abatidos no matadouro público de Patos, Estado da Paraíba, região Nordeste do Brasil para isolamento de Leptospira spp., bem como amostras de sangue para a pesquisa de anticorpos anti-Leptospira spp. O meio de Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris (EMJH) modificado com a adição de 10% de soro de coelho foi usado para o isolamento do agente e a técnica de soroaglutinação microscópica para a pesquisa sorológica. Os cultivos foram observados semanalmente por microscopia de campo escuro durante 16 semanas. Seis animais (7,5%) foram soropositivos na SAM, sendo o sorovar Autumnalis o mais frequente, com cinco soros reagentes, seguido pelo sorovar Icterohaemorragiae, com um soro reagente. Foi isolado micro-organismo morfologicamente similar a Leptospira spp. de uma amostra de ampola do ducto deferente e outra de placenta.

ABSTRACT Placenta, ampulla of the deferent duct, and seminal vesicle samples were collected from 80 sheep slaughtered in the public slaughterhouse of Patos, Paraíba state, Northeastern region of Brazil, for isolation of Leptospira spp., and blood samples were taken from the same animals to check for the presence of anti-Leptospira spp. antibodies. Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris (EMJH) medium modified with the addition of 10% rabbit serum was used for the leptospira isolation, while the microscopic agglutination test (MAT) was used to check for the presence of antibodies. The cultures were observed weekly by dark field microscopy for 16 weeks. Six animals (7.5%) were seropositive by MAT, the serovar Autumnalis being the most frequent, with 5 reactant sera, followed by the serovar Icterohaemorragiae, with 1 reactant serum. A microorganism morphologically similar to Leptospira spp. was isolated from 1 ampulla of the deferent duct sample and 1 placenta sample.

RESUMO O objetivo do presente trabalho foi determinar a soroprevalência da leptospirose em fêmeas bovinas em idade reprodutiva no Estado da Bahia. A amostragem foi delineada para a determinação da prevalência de propriedades positivas (focos) e de animais soropositivos para a leptospirose. O Estado foi dividido em quatro regiões ou estratos amostrais, nos quais foram examinadas 10.823 fêmeas bovinas com idade ≥ 24 meses distribuídas em 1.414 propriedades. A reação de Soroaglutinação Microscópica (SAM), empregando 23 sorovares de Leptospira spp. como antígenos, foi utilizada como teste diagnóstico. O rebanho foi considerado foco quando apresentou pelo menos um animal soropositivo. As prevalências de foco e de animais soropositivos no Estado foram de 77,93% [IC 95% = 75,73% – 79.99%] e 45,42% [IC 95% = 42,00% – 48,88%], respectivamente.

ABSTRACT The aim of this work was to determine the seroprevalence of leptospirosis in reproductive-age bovine females in Bahia State, Northeastern Brazil. The sampling was delineated for the determination of the prevalence of seropositive animals as well as herds positive for bovine leptospiroses (foci). The state was divided into 4 regions or sampling strata in which 10,823 bovine females aged ≥ 24 months allocated in 1,414 herds were sampled. The microscopic agglutination test (MAT), using 23 Leptospira spp. serovars as antigens, was employed as a diagnostic test. The herd was considered positive if at least one animal was seropositive. The prevalences of positive herds and seropositive animals in the state were 77.93% [75.73%–79.99%] and 45.42% [42.00%–48.88%], respectively. Serovar Hardjo (Hardjoprajitno) was the most frequent, with 34.49% [31.93%–37.14%] of positive herds and 14.95% [12.59%–17.67%] of seropositive animals in the different regions.

RESUMO Com o objetivo de determinar a prevalência de aglutininas anti-Leptospira spp., foi realizado um inquérito sorológico em 131 suínos abatidos no matadouro público de Patos, Estado da Paraíba, Brasil. Para o diagnóstico sorológico de leptospirose, foi utilizada a técnica de soroaglutinação microscópica (SAM), utilizando-se culturas vivas de 22 sorovares patogênicos e dois sorovares saprófitos de Leptospira spp. Para a determinação do sorovar mais provável, foram considerados o título de aglutininas e a freqüência de soros reagentes. Soros que apresentaram títulos iguais para dois ou mais sorovares foram excluídos desta análise. Dos 131 suínos, 44 foram soropositivos para pelo menos um dos sorovares empregados, resultando em uma soroprevalência de 33,6% (IC 95% = 25,5% 42,4%). O sorovar mais provável foi o Pomona, com 38 (29,0%; IC 95% = 21,4% – 37,6%) soros reagentes. Também foram constatadas reações sorológicas para os seguintes sorovares: Pyrogenes (2,3%; IC 95% = 0,5% – 6,5%), Canicola (1,5%; IC 95% = 0,2% – 5,4%) e Shermani (0,8%; IC 95% = 0,02% – 4,2%). Houve diferença significativa na soroprevalência para o sorovar Pomona em relação aos demais sorovares (P < 0,0001).

ABSTRACT A serologic survey was conducted among 131 swine slaughtered in the public slaughterhouse of Patos city, Northeast region of Brazil, to determine the prevalence of anti-Leptospira spp. agglutinins. For serologic diagnosis of leptospirosis, the microscopic agglutination test (MAT) was carried out using live cultures of 22 pathogenic and two saprophytic Leptospira spp. serovars. The most frequent serovar was found crossing the results of frequency and titer of agglutinins, and sera presenting equal titers for two or more serovars were not considered for this analysis. Of the 131 swine analyzed, 44 were seropositive for at least one Leptospira spp. serovar, resulting in a seroprevalence of 33.6% (95% CI = 25.5% 42.4%). The most frequent serovar was Pomona, with 38 (29.0%; 95% CI = 21.4% 37.6%) reactant sera. Other reactant serovars and respective prevalence were: Pyrogenes (2.3%; 95% CI = 0.5% 6.5%), Canicola (1.5%; 95% CI = 0.2% 5.4%) and Shermani (0.8%; 95% CI = 0.02% 4.2%). There was statistical difference in seroprevalence to serovar Pomona compared with others reactant serovars (P < 0.0001).

RESUMO O presente estudo teve como objetivo determinar a soroprevalência da leptospirose bovina em fêmeas em idade reprodutiva do Estado de São Paulo, estratificado em sete regiões produtoras. Foram utilizados o delineamento estatístico, as amostras sorológicas e as informações contidas nos questionários empregados no Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCETB), instituído pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, considerando-se a utilização de fêmeas bovinas com idade ‡ a 24 meses (excluindo-se machos), diferentes tipos de produção, práticas de manejo, finalidades de reprodução, tamanho dos rebanhos e sistema de comercialização. Realizou-se a Soroaglutinação Microscópica (SAM) em 8.216 amostras sorológicas de animais provenientes de 1.021 propriedades. De acordo com os resultados obtidos, a infecção por Leptospira spp. ocorre em todo o Estado de São Paulo, com soroprevalência de 49,4% (IC 95% = 44,4%-54,4%) nas fêmeas bovinas em idade reprodutiva e em 718 (71,3%; IC 95% = 68,5%-74%) das propriedades analisadas. O sorovar Hardjo (46%) e sua associação com o sorovar Wolffi (21%) foram prevalentes entre o total de animais sororeagentes, seguidos pelos sorovares Shermani (8,9%), Autumnalis (4,4%) e Grippotyphosa (3,9%). Leptospira spp. está distribuída por todo estado e independe do tipo de exploração, manejo e das práticas de reprodução adotadas nos rebanhos.

ABSTRACT The objective of the present study was to determine the seroprevalence of bovine leptopirosis in São Paulo State, stratified in seven cattle production regions. It was based on the statistic delineation, serological samples and responses to the survey employed in the National Program for Control and Eradication of Brucelosis and Tuberculosis established by Ministry of Agriculture (2001). From the herds selected, serological analysis was only conducted on the cows ‡ 24 months old (excluding the males). The study took into consideration the herd size, the type of productive exploration, the reproductive handling, bovine practices and the commercialization system. The microscopic agglutination test (MAT) was applied on 8,216 serum samples from 1,021 different farms. The results showed that leptospirose infection occurs all over the seven regions of São Paulo State with 49.4% (CI 95% = 44.4–54.4%) animal seroprevalence and in 718 (71.3%; CI 95% = 68.5–74.0%) of the herds analyzed. Hardjo (46%) was the prevalent serovar for all the animals examined, followed by the Hardjo/Wolffi association (21%), Shermani (8.9%), Autumnalis (4.4%) and Grippotyphosa (3.9%). Leptospira spp. is present in all regions of the State of São Paulo and its occurrence is independent of the handling conditions and reproductive practices adopted in the herds.

RESUMO Com o objetivo de determinar a freqüência de aglutininas anti-leptospiras, foi realizado um inquérito sorológico em 164 matrizes de uma granja suína de ciclo completo localizada no Município de Ibiúna, Estado de São Paulo, Brasil. Para a detecção de anticorpos anti-leptospiras, foi utilizada a técnica de soroaglutinação microscópica (SAM), utilizando-se culturas vivas de 22 sorovares patogênicos e dois sorovares saprófitos de Leptospira spp. Para a determinação do sorovar mais provável, foram considerados o título de aglutininas e a freqüência de soros reagentes, e soros que apresentaram títulos iguais para dois ou mais sorovares foram excluídos desta análise. Das 164 matrizes suínas, 27 (16,5%) foram soropositivas para pelo menos um dos sorovares empregados. O sorovar mais provável foi o Hardjo (Hardjobovis), com 13 (54,2%) soros reagentes. Também foram constatadas reações sorológicas para os seguintes sorovares: Shermani (16,6%), Bratislava (12,5%), Autumnalis (12,5%) and Icterohaemorrhagiae (4,2%).

ABSTRACT A serologic survey was conducted among 164 sows from a single farrow-to-finish swine herd located in the Ibiúna municipality, state of São Paulo, Brasil, to determine the frequency of antileptospires agglutinins. For detection of anti-leptospires antibodies, the microscopic serumagglutination test (MAT) was carried out using live cultures of 22 pathogenic and two saprophytic Leptospira spp. serovars. The most frequent serovar was found crossing the results of frequency and titer of agglutinins, and sera presenting equal titers for two or more serovars were not considered for this analysis. Of the 164 sows, 27 (16.5%) were seropositive for at least one Leptospira spp. serovar. The most frequent serovar was Hardjo (Hardjobovis), with 13 (54.2%) reactant sera. Other reactant serovars and respective frequency were: Shermani (16.6%), Bratislava (12.5%), Autumnalis (12.5%) and Icterohaemorrhagiae (4.2%).

Investigou-se a prevalência de leptospirose em cães da cidade de Campina Grande, PB, e realizou-se um estudo de fatores de risco para a infecção. Foram examinadas 285 amostras de soro sangüíneo de cães colhidas durante a campanha de vacinação anti-rábica animal, conduzida em setembro de 2003. O diagnóstico da leptospirose foi realizado pela técnica de soroaglutinação microscópica, utilizando-se uma coleção de 22 sorovares. Para a caracterização do sorovar mais provável, levou-se em conta a titulação e a freqüência. A prevalência encontrada foi de 21,4% (IC 95% = 16,8%-26,6%), com maior freqüência dos sorovares autumnalis (7,4%), copenhageni (6%) e canicola (2,1%). A análise de regressão logística multivariada mostrou que os fatores de risco para a leptospirose foram: idade superior a um ano (odds ratio = 3,00; P = 0,006), raça não definida (odds ratio = 4,02; P = 0,011) e ocorrência de enchentes (odds ratio = 2,32; P = 0,039).

The prevalence of leptospirosis was investigated in dogs from Campina Grande city, State of Paraíba, Brazil, and the risk factors for infection were analyzed. Two hundred and eighty five blood samples were collected from dogs during the rabies vaccination campaign, in September 2003. The diagnostic method run for leptospirosis was the microscopic agglutination test, using a batch of 22 leptospiral serovars. The most prevalent serovar was found crossing the results of frequency and titer of agglutinins. The prevalence was 21.4% (95% CI = 16.8%-26.6%) and most frequent reactant serovars were autumnalis (7.4%), copenhageni (6%) and canicola (2.1%). The multivariate logistic regression analysis showed that the risk factors for leptospirosis were: age older than one year (odds ratio = 3.00; P = 0.006), mixed breed (odds ratio = 4.02; P = 0.011) and occurrence of floods in the area (odds ratio = 2.32; P = 0.039).